Анализ ПЦР

Одним из сверхточных современных медицинских исследований, основанных на изучении молекулярно–генетических связей в плазме крови, является анализ ПЦР (PCR) – полимеразной цепной реакции. Метод ПЦР позволяет обнаружить в организме пациента определенные недуги, вызванные инфекциями и вирусами, или относящиеся к генетическим болезням, передающимся по наследству. Анализ ПЦР помогает выявить болезни, протекающие как в острой, так и в хронической, бессимптомной стадии. Такое исследование очень важно для предотвращения развития болезней: обнаружив недуг в самом начале его развития, можно вылечить болезнь до того момента, пока она начнет разрушать организм пациента или свести его последствия к минимуму.

Сегодня диагностика по методу ПЦР – это «золотой стандарт» в определении возбудителей большинства инфекционных заболеваний. В каждой клинике или лаборатории такое исследование проводится каждый день, его результаты ложатся в основу множества диагнозов, а в некоторых случаях именно расшифровка данных полимеразной цепной реакции является основанием для определения той или иной болезни.

Результаты ПЦР Расшифровка

Метод ПЦР часто помогает врачам в тех случаях, когда другие исследования и диагностики бессильны, или в силу ранней стадии развития недуга не могут определить наличие патогенной микрофлоры в организме пациента. Диагностика по методу PCR является более точным анализом, чем любые другие методы, связанные с изучением наличия бактерий, вирусов и иммунных аномалий в организме человека.

ПЦР диагностика Расшифровка анализа

Особенности и преимущества данного метода исследований

К преимуществам метода PCR можно отнести высокую точность – в ходе изучения участка ДНК или РНК он на 100% обнаруживает или не обнаруживает патогенную микрофлору, способную вызвать тяжелое заболевание. У данного метода не бывает ложноположительных результатов – анализ имеет высокую специфичность, что дает возможность выявить в структуре ДНК и РНК конкретный участок цепи, содержащий определенного возбудителя недуга. Более того, исследование PCR настолько высокочувствительное, что из миллиардов клеток может определить одну, пораженную вирусом, и с точностью установить и вирус, и его возбудителя. По сравнению с другими известными исследованиями, которые имеют чувствительность не выше 100-105 клеток в образце, взятом на обследовании, диагностика ПЦР позволяет исследовать от 10 до 1000 клеток.

Исследованию подвергается не сама сыворотка крови или плазма, а дезоксирибонуклеиновая или рибонуклеиновая кислоты (ДНК и РНК), т. е. генетический материал тех бактерий и вирусов, которые присутствуют в теле пациента и могут спровоцировать развитие болезней. Для каждого вируса имеется свой, уникальный метод его обнаружения, вот почему результаты исследования всегда точны.

ПЦР диагностика Расшифровка анализа

За одно исследование можно обнаружить от одного до нескольких вредоносных микроорганизмов.

Диагностика ПЦР, в отличие от других бактериологических и иммунологических исследований, выполняется очень быстро. Если на проведение менее точных анализов требуется от одного до десяти дней, то ПЦР исследование выполняется в течение 5-7 часов.

Довольно часто мазок ПЦР проводят в качестве доклинического или ретроспективного исследования. Первый метод – это выявление потенциально опасных патогенных микроорганизмов, уже начавших свою разрушительную деятельность в организме, но заболевания еще никак себя не проявляют. Второе исследование – это выявление вирусов и инфекций после проведенного лечения, когда по данным стандартных анализов, пациент считается здоровым, симптомы недуга отсутствуют, но некоторые клетки все еще могут содержать в себе опасных возбудителей. Такие уникальные возможности диагностики позволяют определить инфекционные заболевания в период инкубации, когда вирус только попал в тело человека, но ухудшения самочувствия не наступило, а также в период скрытого течения болезни, если пациент чувствует себя здоровым, но вирус в организме присутствует, хотя никак не дает о себе знать.

Прц диагностика Расшифровка
Вирус

PCR диагностика используется не только для определения вирусов и бактерий, но и для установления личности человека по фрагментам его ДНК, а также для определения кровного родства (отцовство, материнство и т. д.).

За последние десятилетия диагностика по методу PCR, как и другие отрасли медицины и науки, шагнула далеко вперед. Сегодня усовершенствовано оборудование, используемое в процессе исследования биоматериала, возникли новые виды полимеразной цепной реакции, имеются новые тестовые системы, снижающие затраты на проведение анализа и повышающие его точность. Благодаря этому анализ по методу ПЦР стал более доступен широким слоям населения, а количество людей, которым ранняя диагностика болезней по методу PCR спасла жизнь – возросло в тысячи раз.

Что лежит в основе данного исследования

Что же позволяет данному исследованию быть таким точным? Это амплификация, т. е. неоднократное удвоение части цепи дезоксирибонуклеиновой или рибонуклеиновой кислот, для чего используются специальные ферменты и оборудование. Увеличив участок ДНК или РНК в несколько сот раз, появляется возможность для их изучения визуальным способом.

Результаты ПЦР Расшифровка

Но перед тем как увеличивать и изучать тот или иной участок цепи, структура проходит предварительное исследование на наличие потенциально пораженных вирусом участков. Когда такие участки обнаруживаются, их подвергают амплификации.

Проводится диагностика следующим образом. Сначала у пациента берут на анализ биологическую жидкость, присутствующую в организме. Это может быть кровь, моча, слюна, слеза или слизь половых органов. Собранный биоматериал помещается непосредственно в амплификатор, куда вводятся ферментные реактивы, предназначенные для объединения с участками ДНК и РНК непосредственно вирусов и инфекций. Как только реактив и вирус связываются, прибор фиксирует данный участок, и начинает производить копии этого участка, увеличивая в несколько раз. Такое увеличение и копирование происходит непрерывно, «по цепочке», что дает возможность получить несколько сотен, а иногда и тысяч образцов для исследования.

Следующий этап – сравнение полученных участков с имеющимися в базе данными о вирусах и инфекциях. Так обнаруживаются непосредственно патогенные микроорганизмы, устанавливается их количество и время присутствия в организме (как давно они попали в тело).

ПЦР диагностика Расшифровка анализа

Диагностика ПЦР сегодня позволяет не только сравнить обнаруженные вирусы с уже известными, но и выявить мутации, а также дать предположение, к чему эти мутации могут привести.

Ученые – генетики широко применяют метод ПЦР исследования для скрещивания отдельных участков ДНК и изучения новых видов генов и мутаций.

Вирусы и инфекции, определяемые при полимеразной цепной реакции

При проведении ПЦР можно обнаружить множество бактерий и инфекций, вызывающих тяжелые, а подчас и неизлечимые болезни. В первую очередь, это вирус иммунодефицита человека, причем в латентном или инкубационном периоде, когда его последствия еще не проявились. Это очень важно в случаях, когда другие тесты на ВИЧ еще не дают результатов: в первые полгода после возможного инфицирования или у новорожденных, рожденных от ВИЧ-положительной матери.

Также ПЦР исследование выявляет гепатиты всех форм, мононуклеоз инфекционного характера, цитомегаловирусные инфекции, герпесы, все инфекции, передающиеся при половых контактах (уреаплазмы, хламидии, микоплазмы, трихомонады, гарднереллы и т. д.).

ПЦР диагностика Расшифровка анализа
Трихомонады в крови

Определяются и возбудители туберкулеза, а также инфекции, относящиеся к классу онкогенных, т. е. тех, которые в дальнейшем могут вызвать рост злокачественных опухолей (вирус папилломы человека). К более легким, но не менее опасным инфекциям, определяемых при помощи ПЦР исследования, относятся боррелиоз, энцефалит клещевой, грибковые инфекции (кандида) и хеликобактер пилори.

Все эти представители патогенной микрофлоры могут вызвать опасные недуги в различных частях тела пациента, а потому методика ПЦР используется практически во всех отраслях современной медицины. С ее помощью диагностируются гинекологические и урологические заболевания, назначение на проведение ПЦР–исследования можно получить от врача – инфекциониста, пульмонолога и фтизиатра. Не редкость использование полимеразной цепной реакции в области гастроэнтерологии, гематологии, онкологии и т. д.

Как собрать биоматериал для диагностики

Для проведения диагностики от пациента потребуется предоставить биоматериал, в котором могут присутствовать патогенные представители микрофлоры. В качестве материала, подходящего для исследования, берутся жидкости, присутствующие в том или ином органе.

Прц диагностика Расшифровка

Так, вирусы и инфекции, ДНК и РНК, которые может выявить анализ, обитают в крови пациента, его моче и слюне, а также слизистых выделениях носа, половых органах. В более редких случаях, когда требуется глубокая диагностика будущего ребенка, на анализ берут жидкость околоплодного пузыря или плацентарные ткани. Для диагностики вирусов, вызывающих туберкулез, потребуется мокрота, а для обнаружения вируса, вызвавшего папилломы (бородавки), соскоб с эпителия.

Если анализ направлен на диагностику венерических инфекций, передающихся при половых контактах или бытовым путем, врач берет мазок или соскоб влагалищных выделений, слизи из мочеиспускательного канала у мужчин и цервикального канала у женщин. Также в некоторых случаях могут потребоваться не только слизистые выделения половых органов, но и моча пациента.

При диагностике герпеса, инфекционного мононуклеоза, всех видов гепатитов и вируса иммунодефицита человека, потребуется сыворотка крови, в качестве дополнительного биоматериала могут выступать: моча пациента (при цитомегаловирусной инфекции), а также мазок из зева.

Результаты ПЦР Расшифровка

Если задача полимеразной цепной реакции диагностировать инфекции, поразившие работу центральной и периферической нервной системы, для исследования берется жидкость спинного мозга.

Как подготовится к проведению исследования

Чтобы результаты полимеразной цепной реакции были максимально точными, а диагноз правильным и отражающим картину заболевания, к сдаче биоматериала на проведение анализа нужно тщательно подготовиться.

В большей степени итоги обследования зависят от профессионализма лаборанта, оборудования и квалификации врача, проводящего расшифровку полученных данных. Но многое зависит и от пациента, получившего назначение на проведение данной диагностики.

Первое правило, которое нужно соблюдать при сдаче материала – полная стерильность и чистота получаемой биологической жидкости. Если при заборе крови, спинномозговой жидкости или околоплодных вод от пациента ничего не зависит, то к сбору мочи, мокроты и взятию мазка следует готовиться тщательно. Если в исследуемый материал попадут посторонние микроорганизмы, они существенно повлияют на итоговые данные анализа и приведут к выбору неправильной тактики медицинского лечения.

ПЦР диагностика Расшифровка анализа

А это чревато не только приемом ненужных лекарственных препаратов, но и ухудшением работы других органов и систем организма.

Чтобы избежать таких последствий, пациенту следует выполнить несколько простых правил, которые помогут сдать анализы правильно.

  1. Забор всех внутренних жидкостей проводится строго натощак, разрешено только пить чистую негазированную воду;
  2. При взятии мазков из половых органов запрещены любые половые контакты за 24 часа до забора биоматериала;
  3. Моча и мокрота сдают в специальные стерильные контейнеры, выданные в лаборатории или приобретенные для этих целей в аптеке. Перед сбором мочи наружные половые органы нужно тщательно вымыть с применением хозяйственного мыла, первую порцию мочи спустить, а в тару собрать среднюю порцию.

Такие несложные правила подготовки помогут получить максимально точные данные исследования и быстрее начать правильное лечение. Обычно результаты исследования бывают готовы в течение нескольких часов, но чаще всего в лабораториях результаты выдаются на следующий день после забора биоматериала. Пациент получает на руки бланк лаборатории, в котором указаны личные данные пациента, и вирусы, обнаруженные в его организме.

ПЦР диагностика Расшифровка анализа

Полная расшифровка полученных результатов проводится доктором, который выдал направление на проведение исследования, он же устанавливает окончательный диагноз. Иногда по результатам диагностики может быть рекомендовано проведение дополнительных анализов и обследований и консультация узких специалистов. Но чаще всего результаты полимеразной цепной реакции являются основанием для постановки окончательного диагноза.